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關於纖維素 DE-52的處理只需要簡單的幾步
  • 釋出日期│▩✘:2022-03-29      瀏覽次數│▩✘:357
    •   纖維素 DE-52為中等鹼性陰離子交換劑▩•◕·▩,柱層析用於吸附劑▩•◕·▩,用以分離提純多糖◕↟•、肽◕↟•、核苷酸◕↟•、酶◕↟•、血清組分和病毒等各種生物高分子·╃。
       
        纖維素DE-52提取法純化多克隆抗體
        該法提取IgG簡便▩•◕·▩,既可小量提取▩•◕·▩,也可大量製備·╃。
        1◕↟•、批次提取法▩•◕·▩,稱取DEAE-纖維素(DE52)50g▩•◕·▩,置於1000ml燒杯中▩•◕·▩,先以蒸餾水漂浮除去細顆粒▩•◕·▩,再經酸鹼處理後▩•◕·▩,用0.01~0.05mol/L▩•◕·▩,pH8.0左右的磷酸鹽緩衝液(PB)平衡·╃。將水分抽乾▩•◕·▩,或用布氏濾鬥(內放兩層濾紙)過濾▩•◕·▩,收集溼纖維素▩•◕·▩,以降低其離子強度·╃。按1ml血清加溼重5g DE52▩•◕·▩,經過充分攪拌▩•◕·▩,置4℃吸附1h·╃。上清液可再如此處理一次▩•◕·▩,即獲得較純的IgG·╃。該法提取IgG簡便▩•◕·▩,既可小量提取▩•◕·▩,也可大量製備·╃。
        2◕↟•、Tris-Cl離子交換層析法·╃。
       
        纖維素 DE-52處理方法│▩✘:
        關於纖維素 DE-52的處理只有簡單的幾步▩•◕·▩,如下│▩✘:
        1◕↟•、先將乾粉的纖維素浸泡在蒸餾水中▩•◕·▩,一段時間大約3小時左右▩•◕·▩,我偏愛這個時間▩•◕·▩,去除雜質▩•◕·▩,抽乾一下·╃。
        2◕↟•、再用0.5mol/l的HCl溶液浸泡2小時▩•◕·▩,用去離子水洗淨至PH中性▩•◕·▩,並抽乾·╃。
        3◕↟•、將抽乾的纖維素再浸泡在0.5mol/l的NaOH溶液中2小時▩•◕·▩,用去離子水洗至中性▩•◕·▩,抽乾·╃。即可用了·╃。
        對於用過的纖維素▩•◕·▩,可以重複利用多次▩•◕·▩,但需要經過再生處理後才可以使用·╃。再生處理可先用高濃度NaCl(1-2 mol/L)過柱沖洗柱床▩•◕·▩,以除去纖維素 DE-52陰離子交換纖維所吸附的成份·╃。然後▩•◕·▩,再用0.5 mol/L的HCl和NaOH處理▩•◕·▩,處理方法與預處理*相同·╃。
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