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關於纖維素 DE-52的處理只需要簡單的幾步
  • 釋出日期•◕◕·:2022-03-29      瀏覽次數•◕◕·:129
    •   纖維素 DE-52為中等鹼性陰離子交換劑▩╃·↟•,柱層析用於吸附劑▩╃·↟•,用以分離提純多糖╃│·•、肽╃│·•、核苷酸╃│·•、酶╃│·•、血清組分和病毒等各種生物高分子↟│。
       
        纖維素DE-52提取法純化多克隆抗體
        該法提取IgG簡便▩╃·↟•,既可小量提取▩╃·↟•,也可大量製備↟│。
        1╃│·•、批次提取法▩╃·↟•,稱取DEAE-纖維素(DE52)50g▩╃·↟•,置於1000ml燒杯中▩╃·↟•,先以蒸餾水漂浮除去細顆粒▩╃·↟•,再經酸鹼處理後▩╃·↟•,用0.01~0.05mol/L▩╃·↟•,pH8.0左右的磷酸鹽緩衝液(PB)平衡↟│。將水分抽乾▩╃·↟•,或用布氏濾鬥(內放兩層濾紙)過濾▩╃·↟•,收集溼纖維素▩╃·↟•,以降低其離子強度↟│。按1ml血清加溼重5g DE52▩╃·↟•,經過充分攪拌▩╃·↟•,置4℃吸附1h↟│。上清液可再如此處理一次▩╃·↟•,即獲得較純的IgG↟│。該法提取IgG簡便▩╃·↟•,既可小量提取▩╃·↟•,也可大量製備↟│。
        2╃│·•、Tris-Cl離子交換層析法↟│。
       
        纖維素 DE-52處理方法•◕◕·:
        關於纖維素 DE-52的處理只有簡單的幾步▩╃·↟•,如下•◕◕·:
        1╃│·•、先將乾粉的纖維素浸泡在蒸餾水中▩╃·↟•,一段時間大約3小時左右▩╃·↟•,我偏愛這個時間▩╃·↟•,去除雜質▩╃·↟•,抽乾一下↟│。
        2╃│·•、再用0.5mol/l的HCl溶液浸泡2小時▩╃·↟•,用去離子水洗淨至PH中性▩╃·↟•,並抽乾↟│。
        3╃│·•、將抽乾的纖維素再浸泡在0.5mol/l的NaOH溶液中2小時▩╃·↟•,用去離子水洗至中性▩╃·↟•,抽乾↟│。即可用了↟│。
        對於用過的纖維素▩╃·↟•,可以重複利用多次▩╃·↟•,但需要經過再生處理後才可以使用↟│。再生處理可先用高濃度NaCl(1-2 mol/L)過柱沖洗柱床▩╃·↟•,以除去纖維素 DE-52陰離子交換纖維所吸附的成份↟│。然後▩╃·↟•,再用0.5 mol/L的HCl和NaOH處理▩╃·↟•,處理方法與預處理完全相同↟│。
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