產品分類
您現在的位置☁·╃:首頁 > 資料下載 > 大鼠血管內皮細胞蛋白C受體試劑盒說明書

大鼠血管內皮細胞蛋白C受體試劑盒說明書

點選次數☁·╃:568 釋出時間☁·╃:2019/9/12
提 供 商☁·╃: 上海聯碩生物科技有限公司 資料大小☁·╃:
圖片型別☁·╃: 下載次數☁·╃: 120
資料型別☁·╃: DOC 瀏覽次數☁·╃: 568
相關產品☁·╃:
詳細介紹☁·╃: 檔案下載    

大鼠血管內皮細胞蛋白C受體EPCR酶聯免疫

     檢測試劑盒使用說明書         AE94378Ra

使用前仔細閱讀本說明書╃▩╃。酶聯免疫試劑盒是基於雙抗體夾心技術原理│↟▩,來檢測大鼠血管內皮細胞蛋白C受體(EPCR)│↟▩,只能用於研究用途│↟▩,不得用於醫學診斷╃▩╃。

    ☁·╃:用於大鼠血清✘│✘☁、血漿及相關液體樣本中血管內皮細胞蛋白C受體EPCR)測定╃▩╃。

工作原理

本試劑盒採用的生物素雙抗體夾心酶聯免疫吸附法ELISA)測定樣品中大鼠血管內皮細胞蛋白C受體(EPCR)水平╃▩╃。向預先包被大鼠血管內皮細胞蛋白C受體(EPCR)單克隆抗體的酶標孔中加入大鼠血管內皮細胞蛋白C受體(EPCR)│↟▩,溫育;溫育後│↟▩,加入生物素標記的抗血管內皮細胞蛋白C受體EPCR抗體╃▩╃。再與鏈黴親和素-HRP結合│↟▩,形成免疫複合物│↟▩,再經過溫育和洗滌│↟▩,去除未結合的酶│↟▩,然後加入底物A✘│✘☁、B│↟▩,產生藍色│↟▩,並在酸的作用下轉化成終的黃色╃▩╃。顏色的深淺與樣品中大鼠血管內皮細胞蛋白C受體(EPCR)的濃度呈正相關╃▩╃。

試劑盒組成 

試劑盒組成

48孔配置

96孔配置

儲存

說明書

1

1

 

封板膜

2片(48

2片(96

 

密封袋

1

1

 

酶標包被板

1×48

1×96

2-8℃儲存

標準品40μg/L

0.5ml×1

0.5ml×1

2-8℃儲存

標準品稀釋液

3ml×1

6ml×1

2-8℃儲存

鏈黴親和素-HRP

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃儲存

生物素標記的抗EPCR抗體

0.5ml×1

1 ml×1

2-8℃儲存

顯色劑A

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃儲存

顯色劑B

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃儲存

終止液

3ml×1

6ml×1

2-8℃儲存

濃縮洗滌液

20ml×20倍)×1

20ml×30倍)×1

2-8℃儲存

 

需要而未提供的試劑和器材

  • 37恆溫箱╃▩╃。
  • 標準規格酶標儀╃▩╃。
  • 精密移液器及一次性吸頭
  • 蒸餾水│↟▩,
  • 一次性試管
  • 吸水紙

 

注意事項

  • 從2-8℃取出的試劑盒│↟▩,在開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘╃▩╃。酶標包被板開封后如未用完│↟▩,板條應裝入密封袋中儲存╃▩╃。
  • 各步加樣均應使用加樣器│↟▩,並經常校對其準確性│↟▩,以避免試驗誤差
  • 嚴格按照說明書的操作進行│↟▩,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
  • 免交叉汙染│↟▩,要避免重複使用手中的吸頭和封板膜╃▩╃。
  • 不用的其它試劑應包裝好或蓋好╃▩╃。不同批號的試劑不要混用╃▩╃。保質前使用╃▩╃。
  • 底物B對光敏感│↟▩,避免長時間暴露於光下╃▩╃。

 

洗板方法

 

手工洗板方法☁·╃:甩掉酶標板內的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙│↟▩,酶標板朝下用力拍幾次;將稀釋後的洗滌液至少0.35ml注入孔內│↟▩,浸泡1-2分鐘╃▩╃。根據需要│↟▩,重複此過程數次╃▩╃。

 

自動洗板☁·╃:如果有自動洗板機│↟▩,應在熟練使用後再用到正式實驗過程中

標本要求 

1.不能檢測含NaN3的樣品│↟▩,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性╃▩╃。

2.標本採集後儘早進行提取│↟▩,提取按相關文獻進行│↟▩,提取後應儘快進行實驗╃▩╃。若不能馬上進行試驗│↟▩,可將標本放於-20℃儲存│↟▩,但避免反覆凍融╃▩╃。

操作程式

  • 標準品的稀釋☁·╃:(本試劑盒提供原倍標準品一支│↟▩,使用者可按照下列圖表在小試管中進行稀釋╃▩╃。)

20μg/L

5號標準品

120μl的原倍標準品加入120μl標準品稀釋液

10μg/L

4號標準品

120μl的5號標準品加入120μl標準品稀釋液

5μg/L

3號標準品

120μl的4號標準品加入120μl標準品稀釋液

2.5μg/L

2號標準品

120μl的3號標準品加入120μl標準品稀釋液

1.25μg/L

1號標準品

120μl的2號標準品加入120μl標準品稀釋液

 

  • 根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數╃▩╃。每個標準品和空白孔建議做復孔╃▩╃。每個樣品根據自己的數量來定│↟▩,能使用復孔的儘量做復孔╃▩╃。
  • 加樣☁·╃:1)空白孔│↟▩,空白對照孔不加樣品│↟▩,生物素標記的抗EPCR抗體│↟▩,鏈黴親和素-HRP│↟▩,只加顯色劑A&B和終止液│↟▩,其餘各步操作相同;2)標準品孔☁·╃:加入標準品50ul│↟▩,鏈黴親和素-HRP50ul(標準品中已事先整合好生物素抗體│↟▩,故不加);3)待測樣品孔☁·╃:加入樣本40ul│↟▩,然後各加入抗EPCR抗體10ul✘│✘☁、鏈黴親和素-HRP50ul│↟▩,蓋上封板膜│↟▩,輕輕震盪混勻│↟▩,37℃溫育60分鐘╃▩╃。
  • 配液☁·╃:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋後備用╃▩╃。
  • 洗滌☁·╃:小心揭掉封板膜│↟▩,棄去液體│↟▩,甩幹│↟▩,每孔加滿洗滌液│↟▩,靜置30秒後棄去│↟▩,如此重複5次│↟▩,拍幹╃▩╃。
  • 顯色☁·╃:每孔先加入顯色劑A50ul│↟▩,再加入顯色劑B50μl│↟▩,輕輕震盪混勻│↟▩,37℃避光顯色15分鐘. 
  • 終止☁·╃:每孔加終止液50μl│↟▩,終止反應(此時藍色立轉黃色)╃▩╃。
  • 測定☁·╃:以空白空調零│↟▩,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)╃▩╃。 測定應在加終止液後10分鐘以內進行╃▩╃。
  • 根據標準品的濃度及對應的OD值計算出標準曲線的直線迴歸方程│↟▩,再根據樣品的OD值在迴歸方程上計算出對應的樣品濃度╃▩╃。也可以使用各種應用軟體來計算╃▩╃。

操作程式總結☁·╃:

試劑盒效能☁·╃:

1.樣品線性迴歸與預期濃度相關係數R值為0.92以上╃▩╃。

2.批內與批間應分別小於9%和15%

 

檢測範圍☁·╃:

檢測範圍☁·╃:0.6μg/L -22μg/L

 

儲存條件及有效期☁·╃:

 

儲存☁·╃:2-8╃▩╃。

有效期☁·╃:6個月(2-8℃)╃▩╃。

 
客戶至上 用心服務
線上客服
欧美momandsonvideo,波多结衣,荷兰毛茸茸的大bbbb,色综合久久中文综合久久