產品分類
您現在的位置•₪✘✘:首頁 > 資料下載 > 大鼠羥脯氨酸(Hyp)說明書AMEKO

大鼠羥脯氨酸(Hyp)說明書AMEKO

點選次數•₪✘✘:608 釋出時間•₪✘✘:2019/8/2
提 供 商•₪✘✘: 上海聯碩生物科技有限公司 資料大小•₪✘✘:
圖片型別•₪✘✘: 下載次數•₪✘✘: 127
資料型別•₪✘✘: DOC 瀏覽次數•₪✘✘: 608
相關產品•₪✘✘:
詳細介紹•₪✘✘: 檔案下載    

             大鼠羥脯氨酸(Hyp)酶聯免疫

                                   檢測試劑盒使用說明書         AE90789Ra

   使用前仔細閱讀本說明書│☁✘☁。酶聯免疫試劑盒是基於雙抗體夾心技術原理✘✘,來檢測大鼠羥脯氨酸(Hyp)✘✘,只能用於研究用途✘✘,不得用於醫學診斷│☁✘☁。

    •₪✘✘:用於大鼠血清▩·•│、血漿及相關液體樣本中羥脯氨酸(Hyp)測定│☁✘☁。

工作原理

本試劑盒採用的生物素雙抗體夾心酶聯免疫吸附法ELISA)測定樣品中大鼠羥脯氨酸(Hyp)水平│☁✘☁。向預先包被大鼠羥脯氨酸(Hyp)單克隆抗體的酶標孔中加入大鼠羥脯氨酸(Hyp)✘✘,溫育;溫育後✘✘,加入生物素標記的抗Hyp抗體│☁✘☁。再與鏈黴親和素-HRP結合✘✘,形成免疫複合物✘✘,再經過溫育和洗滌✘✘,去除未結合的酶✘✘,然後加入底物A▩·•│、B✘✘,產生藍色✘✘,並在酸的作用下轉化成終的黃色│☁✘☁。顏色的深淺與樣品中大鼠羥脯氨酸(Hyp)的濃度呈正相關│☁✘☁。

試劑盒組成 

試劑盒組成

48孔配置

96孔配置

儲存

說明書

1

1

 

封板膜

2片(48

2片(96

 

密封袋

1

1

 

酶標包被板

1×48

1×96

2-8℃儲存

標準品80μg/L

0.5ml×1

0.5ml×1

2-8℃儲存

標準品稀釋液

3ml×1

6ml×1

2-8℃儲存

鏈黴親和素-HRP

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃儲存

生物素標記的抗Hyp抗體

0.5ml×1

1 ml×1

2-8℃儲存

顯色劑A

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃儲存

顯色劑B

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃儲存

終止液

3ml×1

6ml×1

2-8℃儲存

濃縮洗滌液

20ml×20倍)×1

20ml×30倍)×1

2-8℃儲存

需要而未提供的試劑和器材

  • 37恆溫箱│☁✘☁。
  • 標準規格酶標儀│☁✘☁。
  • 精密移液器及一次性吸頭
  • 蒸餾水✘✘,
  • 一次性試管
  • 吸水紙

注意事項

  • 從2-8℃取出的試劑盒✘✘,在開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘│☁✘☁。酶標包被板開封后如未用完✘✘,板條應裝入密封袋中儲存│☁✘☁。
  • 各步加樣均應使用加樣器✘✘,並經常校對其準確性✘✘,以避免試驗誤差
  • 嚴格按照說明書的操作進行✘✘,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
  • 免交叉汙染✘✘,要避免重複使用手中的吸頭和封板膜│☁✘☁。
  • 不用的其它試劑應包裝好或蓋好│☁✘☁。不同批號的試劑不要混用│☁✘☁。保質前使用│☁✘☁。
  • 底物B對光敏感✘✘,避免長時間暴露於光下│☁✘☁。

洗板方法

手工洗板方法•₪✘✘:甩掉酶標板內的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙✘✘,酶標板朝下用力拍幾次;將稀釋後的洗滌液至少0.35ml注入孔內✘✘,浸泡1-2分鐘│☁✘☁。根據需要✘✘,重複此過程數次│☁✘☁。

自動洗板•₪✘✘:如果有自動洗板機✘✘,應在熟練使用後再用到正式實驗過程中

標本要求 

1.不能檢測含NaN3的樣品✘✘,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性│☁✘☁。

2.標本採集後儘早進行提取✘✘,提取按相關文獻進行✘✘,提取後應儘快進行實驗│☁✘☁。若不能馬上進行試驗✘✘,可將標本放於-20℃儲存✘✘,但避免反覆凍融│☁✘☁。

操作程式

  • 標準品的稀釋•₪✘✘:(本試劑盒提供原倍標準品一支✘✘,使用者可按照下列圖表在小試管中進行稀釋│☁✘☁。)

40μg/L

5號標準品

120μl的原倍標準品加入120μl標準品稀釋液

20μg/L

4號標準品

120μl的5號標準品加入120μl標準品稀釋液

10μg/L

3號標準品

120μl的4號標準品加入120μl標準品稀釋液

5μg/L

2號標準品

120μl的3號標準品加入120μl標準品稀釋液

2.5μg/L

1號標準品

120μl的2號標準品加入120μl標準品稀釋液

 

  • 根據代測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數│☁✘☁。每個標準品和空白孔建議做復孔│☁✘☁。每個樣品根據自己的數量來定✘✘,能使用復孔的儘量做復孔│☁✘☁。
  • 加樣•₪✘✘:1)空白孔✘✘,空白對照孔不加樣品✘✘,生物素標記的抗Hyp抗體✘✘,鏈黴親和素-HRP✘✘,只加顯色劑A&B和終止液✘✘,其餘各步操作相同;2)標準品孔•₪✘✘:加入標準品50ul✘✘,鏈黴親和素-HRP50ul(標準品中已事先整合好生物素抗體✘✘,故不加);3)代測樣品孔•₪✘✘:加入樣本40ul✘✘,然後各加入抗Hyp抗體10ul▩·•│、鏈黴親和素-HRP50ul✘✘,蓋上封板膜✘✘,輕輕震盪混勻✘✘,37℃溫育60分鐘│☁✘☁。
  • 配液•₪✘✘:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋後備用│☁✘☁。
  • 洗滌•₪✘✘:小心揭掉封板膜✘✘,棄去液體✘✘,甩幹✘✘,每孔加滿洗滌液✘✘,靜置30秒後棄去✘✘,如此重複5次✘✘,拍幹│☁✘☁。
  • 顯色•₪✘✘:每孔先加入顯色劑A50ul✘✘,再加入顯色劑B50μl✘✘,輕輕震盪混勻✘✘,37℃避光顯色15分鐘. 
  • 終止•₪✘✘:每孔加終止液50μl✘✘,終止反應(此時藍色立轉黃色)│☁✘☁。
  • 測定•₪✘✘:以空白空調零✘✘,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)│☁✘☁。 測定應在加終止液後10分鐘以內進行│☁✘☁。
  • 根據標準品的濃度及對應的OD值計算出標準曲線的直線迴歸方程✘✘,再根據樣品的OD值在迴歸方程上計算出對應的樣品濃度│☁✘☁。也可以使用各種應用軟體來計算│☁✘☁。

操作程式總結•₪✘✘:

試劑盒效能•₪✘✘:

1.樣品線性迴歸與預期濃度相關係數R值為0.92以上│☁✘☁。

2.批內與批間應分別小於9%和15%

 

檢測範圍•₪✘✘:

檢測範圍•₪✘✘:0-40μg/L│☁✘☁。

 

儲存條件及有效期•₪✘✘:

儲存•₪✘✘:2-8│☁✘☁。

有效期•₪✘✘:6個月(2-8℃)│☁✘☁。

 

 
客戶至上 用心服務
線上客服
欧美momandsonvideo,波多结衣,荷兰毛茸茸的大bbbb,色综合久久中文综合久久