產品分類
您現在的位置✘₪╃☁:首頁 > 資料下載 > 大鼠磷酸化TAU蛋白(P-TAU)酶聯免疫分析(ELISA)

大鼠磷酸化TAU蛋白(P-TAU)酶聯免疫分析(ELISA)

點選次數✘₪╃☁:569 釋出時間✘₪╃☁:2019/7/12
提 供 商✘₪╃☁: 上海聯碩生物科技有限公司 資料大小✘₪╃☁:
圖片型別✘₪╃☁: 下載次數✘₪╃☁: 113
資料型別✘₪╃☁: DOC 瀏覽次數✘₪╃☁: 569
相關產品✘₪╃☁:
詳細介紹✘₪╃☁: 檔案下載    

大鼠磷酸化TAU蛋白(P-TAU酶聯免疫分析(ELISA

試劑盒使用說明書

本試劑僅供研究使用      

目的✘₪╃☁:

本試劑盒用於測定大鼠腦脊液☁╃,血漿及相關液體樣本中磷酸化TAU蛋白(P-TAU)含量·│✘╃。

實驗原理✘₪╃☁:

    本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠磷酸化TAU蛋白(P-TAU)水平·│✘╃。用純化的大鼠磷酸化TAU蛋白(P-TAU)抗體包被微孔板☁╃,製成固相抗體☁╃,往包被單抗的微孔中依次加入磷酸化TAU蛋白(P-TAU)☁╃,再與HRP標記的磷酸化TAU蛋白(P-TAU)抗體結合☁╃,形成抗體-抗原-酶標抗體複合物☁╃,經過*洗滌後加底物TMB顯色·│✘╃。TMBHRP酶的催化下轉化成藍色☁╃,並在酸的作用下轉化成終的黃色·│✘╃。顏色的深淺和樣品中的大鼠磷酸化TAU蛋白(P-TAU)呈正相關·│✘╃。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值)☁╃,透過標準曲線計算樣品中大鼠磷酸化TAU蛋白(P-TAU)濃度·│✘╃。

試劑盒組成✘₪╃☁:

試劑盒組成

      48孔配置

96孔配置

儲存

說明書

1

1

 

封板膜

2片(48

2片(96

 

密封袋

1

1

 

酶標包被板

1×48

1×96

2-8℃儲存

標準品✘₪╃☁:225ng/L

0.5ml×1

0.5ml×1

2-8℃儲存

標準品稀釋液

1.5ml×1

1.5ml×1

2-8℃儲存

酶標試劑

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃儲存

樣品稀釋液

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃儲存

顯色劑A

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃儲存

顯色劑B

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃儲存

終止液

3ml×1

6ml×1

2-8℃儲存

濃縮洗滌液

20ml×20倍)×1

20ml×30倍)×1

2-8℃儲存

樣本處理及要求✘₪╃☁:

1.血清✘₪╃☁:室溫血液自然凝固10-20分鐘☁╃,離心20分鐘左右(2000-3000/分)·│✘╃。仔細收集上清☁╃,儲存過程中如出現沉澱☁╃,應再次離心·│✘╃。

2.血漿✘₪╃☁:應根據標本的要求選擇EDTA▩▩•、者檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑☁╃,混合10-20分鐘後☁╃,離心20分鐘左右(2000-3000/分)·│✘╃。仔細收集上清☁╃,儲存過程中如有沉澱形成☁╃,應該再次離心·│✘╃。

3.尿液✘₪╃☁:用無菌管收集☁╃,離心20分鐘左右(2000-3000/分)·│✘╃。仔細收集上清☁╃,儲存過程中如有沉澱形成☁╃,應再次離心·│✘╃。胸腹水▩▩•、腦脊液參照實行·│✘╃。

4.細胞培養上清✘₪╃☁:檢測分泌性的成份時☁╃,用無菌管收集·│✘╃。離心20分鐘左右(2000-3000/分)·│✘╃。仔細收集上清·│✘╃。檢測細胞內的成份時☁╃,用PBSPH7.2-7.4)稀釋細胞懸液☁╃,細胞濃度達到100/ml左右·│✘╃。透過反覆凍融☁╃,以使細胞破壞並放出細胞內成份·│✘╃。離心20分鐘左右(2000-3000/分)·│✘╃。仔細收集上清·│✘╃。儲存過程中如有沉澱形成☁╃,應再次離心·│✘╃。

5.組織標本✘₪╃☁:切割標本後☁╃,稱取重量·│✘╃。加入一定量的PBS☁╃,PH7.4·│✘╃。用液氮迅速冷凍儲存備用·│✘╃。標本融化後仍然保持2-8℃的溫度·│✘╃。加入一定量的PBSPH7.4)☁╃,用手工或勻漿器將標本勻漿充分·│✘╃。離心20分鐘左右(2000-3000/分)·│✘╃。仔細收集上清·│✘╃。分裝後一份待檢測☁╃,其餘冷凍備用·│✘╃。

操作步驟

  1. 標準品的稀釋與加樣✘₪╃☁:在酶標包被板上設標準品孔10孔☁╃,在▩▩•、第二孔中分別加標準品100μl☁╃,然後在▩▩•、第二孔中加標準品稀釋液50μl☁╃,混勻;然後從孔▩▩•、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔☁╃,再在第三▩▩•、第四孔分別加標準品稀釋液50μl☁╃,混勻;然後在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉☁╃,再各取50μl分別加到第五▩▩•、第六孔中☁╃,再在第五▩▩•、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul☁╃,混勻;混勻後從第五▩▩•、第六孔中各取50μl分別加到第七▩▩•、第八孔中☁╃,再在第七▩▩•、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl☁╃,混勻後從第七▩▩•、第八孔中分別取50μl加到第九▩▩•、第十孔中☁╃,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl☁╃,混勻後從第九第十孔中各取50μl棄掉·│✘╃。(稀釋後各孔加樣量都為50μl☁╃,濃度分別為150ng/L☁╃,100ng/L ☁╃,50ng/L☁╃,25ng/L☁╃,12.5ng/L)·│✘╃。
  2. 加樣✘₪╃☁:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑☁╃,其餘各步操作相同)▩▩•、待測樣品孔·│✘╃。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl☁╃,然後再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)·│✘╃。加樣將樣品加於酶標板孔底部☁╃,儘量不觸及孔壁☁╃,輕輕晃動混勻·│✘╃。
  3. 溫育✘₪╃☁:用封板膜封板後置37℃溫育30分鐘·│✘╃。
  4. 配液✘₪╃☁:將3048T20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水3048T20倍)倍稀釋後備用·│✘╃。
  5. 洗滌✘₪╃☁:小心揭掉封板膜☁╃,棄去液體☁╃,甩幹☁╃,每孔加滿洗滌液☁╃,靜置30秒後棄去☁╃,如此重複5次☁╃,拍幹·│✘╃。
  6. 加酶✘₪╃☁:每孔加入酶標試劑50μl☁╃,空白孔除外·│✘╃。
  7. 溫育✘₪╃☁:操作同3·│✘╃。
  8. 洗滌✘₪╃☁:操作同5·│✘╃。
  9. 顯色✘₪╃☁:每孔先加入顯色劑A50μl☁╃,再加入顯色劑B50μl☁╃,輕輕震盪混勻☁╃,37℃避光顯色15分鐘.
  10. 終止✘₪╃☁:每孔加終止液50μl☁╃,終止反應(此時藍色立轉黃色)·│✘╃。
  11. 測定✘₪╃☁:以空白空調零☁╃,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)·│✘╃。 測定應在加終止液後15分鐘以內進行·│✘╃。

注意事項✘₪╃☁:

  1. 試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘後方可使用☁╃,酶標包被板開封后如未用完☁╃,板條應裝入密封袋中儲存·│✘╃。
  2. 濃洗滌液可能會有結晶析出☁╃,稀釋時可在水浴中加溫助溶☁╃,洗滌時不影響結果·│✘╃。
  3. 各步加樣均應使用加樣器☁╃,並經常校對其準確性☁╃,以避免試驗誤差·│✘╃。一次加樣時間控制在5分鐘內☁╃,如標本數量多☁╃,推薦使用排槍加樣·│✘╃。
  4. 請每次測定的同時做標準曲線☁╃,然後做復孔·│✘╃。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大於標準品孔孔的OD值)☁╃,請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)後再測定☁╃,計算時請後乘以總稀釋倍數(×n×5)·│✘╃。
  5. 封板膜只限一次性使用☁╃,以避免交叉汙染·│✘╃。
  6. 底物請避光儲存·│✘╃。
  7. 嚴格按照說明書的操作進行☁╃,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
  8. 所有樣品☁╃,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理·│✘╃。
  9. 本試劑不同批號組分不得混用·│✘╃。

 10. 如與英文說明書有異☁╃,以英文說明書為準·│✘╃。

計算✘₪╃☁:

   以標準物的濃度為橫座標☁╃,OD值為縱座標☁╃,在座標紙上繪出標準曲線☁╃,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線迴歸方程式☁╃,將樣品的OD代入方程式☁╃,計算出樣品濃度☁╃,再乘以稀釋倍數☁╃,即為樣品的實際濃度·│✘╃。

試劑盒效能✘₪╃☁:

1.樣品線性迴歸與預期濃度相關係數R值為0.95以上·│✘╃。

2.批內與批間應分別小於9%11%

檢測範圍✘₪╃☁: 

6ng/L -200ng/L                           

儲存條件及有效期✘₪╃☁:

1.試劑盒儲存✘₪╃☁:2-8·│✘╃。

2.有效期✘₪╃☁:6個月

 

 
客戶至上 用心服務
線上客服
欧美momandsonvideo,波多结衣,荷兰毛茸茸的大bbbb,色综合久久中文综合久久