產品分類
您現在的位置╃│•✘:首頁 > 資料下載 > 大鼠蛋白質修補同系物(PTCH)酶聯免疫檢測試劑盒使用說明書

大鼠蛋白質修補同系物(PTCH)酶聯免疫檢測試劑盒使用說明書

點選次數╃│•✘:593 釋出時間╃│•✘:2019/6/21
提 供 商╃│•✘: 上海聯碩生物科技有限公司 資料大小╃│•✘:
圖片型別╃│•✘: 下載次數╃│•✘: 119
資料型別╃│•✘: DOC 瀏覽次數╃│•✘: 593
相關產品╃│•✘:
詳細介紹╃│•✘: 檔案下載    

大鼠蛋白質修補同系物(PTCH)酶聯免疫

     檢測試劑盒使用說明書        AE91758Ra

   使用前仔細閱讀本說明書·◕☁。酶聯免疫試劑盒是基於雙抗體夾心技術原理╃▩☁││,來檢測大鼠蛋白質修補同系物(PTCH)╃▩☁││,只能用於研究用途╃▩☁││,不得用於醫學診斷·◕☁。

   ╃│•✘:用於大鼠血清₪✘、血漿及相關液體樣本中蛋白質修補同系物(PTCH)測定·◕☁。

工作原理:

本試劑盒採用的生物素雙抗體夾心酶聯免疫吸附法ELISA)測定樣品中大鼠蛋白質修補同系物(PTCH)水平·◕☁。向預先包被了大鼠蛋白質修補同系物(PTCH)單克隆抗體的酶標孔中加入大鼠蛋白質修補同系物(PTCH)╃▩☁││,溫育;溫育後╃▩☁││,加入生物素標記的抗蛋白質修補同系物(PTCH)抗體·◕☁。再與鏈黴親和素-HRP結合╃▩☁││,形成免疫複合物╃▩☁││,再經過溫育和洗滌╃▩☁││,去除未結合的酶╃▩☁││,然後加入底物A₪✘、B╃▩☁││,產生藍色╃▩☁││,並在酸的作用下轉化成終的黃色·◕☁。顏色的深淺與樣品中大鼠蛋白質修補同系物(PTCH)的濃度呈正相關·◕☁。

試劑盒組成 

試劑盒組成

48孔配置

96孔配置

儲存

說明書

1

1

 

封板膜

2片(48

2片(96

 

密封袋

1

1

 

酶標包被板

1×48

1×96

2-8℃儲存

標準品1600 ng/L

0.5ml×1

0.5ml×1

2-8℃儲存

標準品稀釋液

3ml×1

6ml×1

2-8℃儲存

鏈黴親和素-HRP

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃儲存

生物素標記的抗PTCH抗體

0.5ml×1

1 ml×1

2-8℃儲存

顯色劑A

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃儲存

顯色劑B

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃儲存

終止液

3ml×1

6ml×1

2-8℃儲存

濃縮洗滌液

20ml×20倍)×1

20ml×30倍)×1

2-8℃儲存

 

需要而未提供的試劑和器材

  1. 37恆溫箱·◕☁。
  2. 標準規格酶標儀·◕☁。
  3. 精密移液器及一次性吸頭
  4. 蒸餾水╃▩☁││,
  5. 一次性試管
  6. 吸水紙

 

注意事項

  1. 從2-8℃取出的試劑盒╃▩☁││,在開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘·◕☁。酶標包被板開封后如未用完╃▩☁││,板條應裝入密封袋中儲存·◕☁。
  2. 各步加樣均應使用加樣器╃▩☁││,並經常校對其準確性╃▩☁││,以避免試驗誤差
  3. 嚴格按照說明書的操作進行╃▩☁││,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
  4. 免交叉汙染╃▩☁││,要避免重複使用手中的吸頭和封板膜·◕☁。
  5. 不用的其它試劑應包裝好或蓋好·◕☁。不同批號的試劑不要混用·◕☁。保質前使用·◕☁。
  6. 底物B對光敏感╃▩☁││,避免長時間暴露於光下·◕☁。

 

洗板方法

手工洗板方法╃│•✘:甩掉酶標板內的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙╃▩☁││,酶標板朝下用力拍幾次;將稀釋後的洗滌液至少0.35ml注入孔內╃▩☁││,浸泡1-2分鐘·◕☁。根據需要╃▩☁││,重複此過程數次·◕☁。

自動洗板╃│•✘:如果有自動洗板機╃▩☁││,應在熟練使用後再用到正式實驗過程中

 

標本要求 

1.不能檢測含NaN3的樣品╃▩☁││,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性·◕☁。

2.標本採集後儘早進行提取╃▩☁││,提取按相關文獻進行╃▩☁││,提取後應儘快進行實驗·◕☁。若不能馬上進行試驗╃▩☁││,可將標本放於-20℃儲存╃▩☁││,但避免反覆凍融·◕☁。

操作程式

  1. 標準品的稀釋╃│•✘:(本試劑盒提供原倍標準品一支╃▩☁││,使用者可按照下列圖表在小試管中進行稀釋·◕☁。)

    800 ng/L

    5號標準品

    120μl的原倍標準品加入120μl標準品稀釋液

    400 ng/L

    4號標準品

    120μl的5號標準品加入120μl標準品稀釋液

    200 ng/L

    3號標準品

    120μl的4號標準品加入120μl標準品稀釋液

    100 ng/L

    2號標準品

    120μl的3號標準品加入120μl標準品稀釋液

    50 ng/L

    1號標準品

    120μl的2號標準品加入120μl標準品稀釋液

  2. 根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數·◕☁。每個標準品和空白孔建議做復孔·◕☁。每個樣品根據自己的數量來定╃▩☁││,能使用復孔的儘量做復孔·◕☁。
  3. 加樣╃│•✘:1)空白孔╃▩☁││,空白對照孔不加樣品╃▩☁││,生物素標記的抗PTCH抗體╃▩☁││,鏈黴親和素-HRP╃▩☁││,只加顯色劑A&B和終止液╃▩☁││,其餘各步操作相同;2)標準品孔╃│•✘:加入標準品50ul╃▩☁││,鏈黴親和素-HRP50ul(標準品中已事先整合好生物素抗體╃▩☁││,故不加);3)待測樣品孔╃│•✘:加入樣本40ul╃▩☁││,然後各加入抗PTCH抗體10ul₪✘、鏈黴親和素-HRP50ul╃▩☁││,蓋上封板膜╃▩☁││,輕輕震盪混勻╃▩☁││,37℃溫育60分鐘·◕☁。
  4. 配液╃│•✘:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋後備用·◕☁。
  5. 洗滌╃│•✘:小心揭掉封板膜╃▩☁││,棄去液體╃▩☁││,甩幹╃▩☁││,每孔加滿洗滌液╃▩☁││,靜置30秒後棄去╃▩☁││,如此重複5次╃▩☁││,拍幹·◕☁。
  6. 顯色╃│•✘:每孔先加入顯色劑A50ul╃▩☁││,再加入顯色劑B50μl╃▩☁││,輕輕震盪混勻╃▩☁││,37℃避光顯色15分鐘. 
  7. 終止╃│•✘:每孔加終止液50μl╃▩☁││,終止反應(此時藍色立轉黃色)·◕☁。
  8. 測定╃│•✘:以空白空調零╃▩☁││,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)·◕☁。 測定應在加終止液後10分鐘以內進行·◕☁。
  9. 根據標準品的濃度及對應的OD值計算出標準曲線的直線迴歸方程╃▩☁││,再根據樣品的OD值在迴歸方程上計算出對應的樣品濃度·◕☁。也可以使用各種應用軟體來計算·◕☁。

 

操作程式總結╃│•✘:

試劑盒效能╃│•✘:

1.樣品線性迴歸與預期濃度相關係數R值為0.92以上·◕☁。

2.批內與批間應分別小於9%和15%

 

檢測範圍╃│•✘:

檢測範圍╃│•✘:25 ng/L -900 ng/L

   

儲存條件及有效期╃│•✘:

儲存╃│•✘:2-8·◕☁。

有效期╃│•✘:6個月(2-8℃)·◕☁。

 
客戶至上 用心服務
線上客服
欧美momandsonvideo,波多结衣,荷兰毛茸茸的大bbbb,色综合久久中文综合久久