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ELISA試驗操作失敗的主要原因
  • 釋出日期₪₪:2019-12-16      瀏覽次數₪₪:1044
    • 我們知道▩₪▩₪▩,ELISA測定中影響要素較多▩₪▩₪▩,而且其操作中有一定的技術要求▩₪▩₪▩,在查驗中除正常反響外▩₪▩₪▩,有時常可見到一些過錯結果(即假陽性或假陰性)▩₪▩₪▩,那麼致使試驗不成功的主要原因有哪些咧↟││☁✘?

       

      ₪₪:標本的影響₪₪:

      溶血標本及混有紅細胞的血清採用ELISA法檢測易發生假陽性✘•☁。或許是溶血血清中含有過氧化酶物質(紅細胞或血紅蛋 白中的亞鐵血紅素)▩₪▩₪▩,在洗刷過程中往往難以*洗脫▩₪▩₪▩,它可使H2O2釋放出原生態氧(O)▩₪▩₪▩,從而催化底物四甲基聯苯胺生成可溶性的有色物質▩₪▩₪▩,即顯藍色▩₪▩₪▩,發生假陽性✘•☁。所以嚴峻溶血標本禁用✘•☁。  

        

      二₪│₪◕、標本受細菌汙染₪₪:

      因菌體中或許含有內源性辣根過氧化物酶▩₪▩₪▩,因而▩₪▩₪▩,被細菌汙染的標本同溶血標本相同▩₪▩₪▩,亦可發生非特異性顯色而攪擾 測定結果✘•☁。

       

      三₪│₪◕、標本儲存不妥₪₪:

      在冰箱中儲存過久的標本▩₪▩₪▩,在間接法ELISA測定中會導致本底過深₪│₪◕、形成假陽性;為克服上述攪擾▩₪▩₪▩,ELISA試劑盒測定的血清標本宜為新鮮收集;如不能立即測定▩₪▩₪▩,5d內測定的血清標本可存放於4℃▩₪▩₪▩,1周後測定的血清標本應低溫凍存;凍存後融解的標本▩₪▩₪▩,蛋白質部分濃縮▩₪▩₪▩,分佈不均▩₪▩₪▩,應充沛混合後再測定▩₪▩₪▩,但混勻時應輕柔▩₪▩₪▩,不可強烈振動✘•☁。    

       

      四₪│₪◕、標本凝結不全₪₪:

      在工作中▩₪▩₪▩,有時為了爭取時間快速檢測▩₪▩₪▩,常在血液還未開始凝結時即強行離心別離血清▩₪▩₪▩,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原▩₪▩₪▩,在ELISA測定過程中能夠形成肉眼可見的纖維蛋白塊▩₪▩₪▩,易形成假陽性結果;因而血液標本收集後有必要使其充沛凝結後再別離血清✘•☁。

       

       

       

       

       

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